چگونه خلوص آب بر نتایج کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا تأثیر می گذارد؟

شما به تازگی یک روش گرادیان را اجرا کرده اید که هفته گذشته کاملاً کار می کرد. استانداردهای کالیبراسیون تمیز به نظر می رسند، اما کروماتوگرام نمونه یک پیک اضافی را در 23.8 دقیقه نشان می دهد. ستون را جایگزین می کنید، بافر تازه را آماده می کنید و آشکارساز را بررسی می کنید. اوج هنوز آنجاست. سپس آب را به فاز متحرک مبادله می کنید و آرتیفکت ناپدید می شود. این واقعیت کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا است: خلوص آب در زیر هر جداسازی قرار می گیرد و وقتی تغییر می کند، روش نیز با آن تغییر می کند.

خلوص آب به چهار روش عملی بر کیفیت داده‌های HPLC تأثیر می‌گذارد: پایداری خط پایه، شکل پیک، تکرارپذیری حفظ و طول عمر ابزار. آلاینده های درگیر ممکن است مولکول های آلی، یون های محلول، ذرات یا میکروب ها باشند. حتی مقدار کمی از یک نوع ناخالصی می تواند عواقبی خارج از غلظت آن ایجاد کند.

اثرات اصلی خلوص آب بر HPLC

در یک سیستم HPLC، آب یک معرف است، نه یک پس زمینه غیرفعال. بافر را حمل می کند، نمونه را حل می کند و به پس زمینه آشکارساز کمک می کند. بنابراین ناخالصی های موجود در آب مستقیماً به سیگنال تحلیلی منتقل می شوند. جدول زیر رایج ترین آلاینده ها و اثرات آنها را خلاصه می کند.

این تأثیرات فقط نظری نیستند. یک بیوفیلم میکروبی در یک مخزن آب می تواند متابولیت های جذب کننده اشعه ماوراء بنفش را آزاد کند و هنگامی که آن فیلم تشکیل شد، جایگزین کردن آب به سادگی ممکن است مشکل را حل نکند تا زمانی که مخزن تمیز و ضدعفونی شود.

"HPLC-Grade" و آب نوع 1 در واقع به چه معناست

اکثر روش های تحلیلی به آبی نیاز دارند که دارای مشخصات نوع 1 باشد. از نظر عملی، این بدان معناست که مقاومت در دمای 25 درجه سانتیگراد حدود 18.2 مگا اهم سانتی متر است، رسانایی نزدیک به 0.055 میکروزیمنس بر سانتی متر است و کل کربن آلی به اندازه ای کم است که آب پس زمینه UV یا MS قابل مشاهده ایجاد نمی کند. مقاومت به تنهایی کافی نیست. همچنین باید سطح TOC، تعداد ذرات، و در برخی کاربردها، مقادیر سیلیکات یا سدیم را بدانید.

pH آب تصفیه شده مشخصات مفیدی نیست. آب فوق خالص تقریباً هیچ ظرفیت بافری ندارد و به سرعت دی اکسید کربن را از هوا جذب می کند، بنابراین pH اندازه گیری شده در حدود 5.6 به سادگی CO2 محلول را منعکس می کند. pH که مهم است، pH فاز متحرک بافری است که شما آماده می کنید.

الزامات کیفیت آب نیز به آشکارساز بستگی دارد. تشخیص اشعه ماوراء بنفش در 210 نانومتر به ویژه به آلودگی آلی حساس است زیرا بسیاری از پیوندهای کربن-اکسیژن و کربن-نیتروژن در آنجا جذب می شوند. LC-MS به آب با ناخالصی های غیرفرار بسیار کم برای جلوگیری از سرکوب یون و تشکیل ترکیب اضافی نیاز دارد. آشکارسازهای تبخیری به طور مشابه تحت تأثیر آلودگی غیرفرار قرار می گیرند زیرا سیگنال پس زمینه را افزایش می دهد. بنابراین آب نوع 1 تقریباً برای هر کاربرد HPLC نقطه شروع مناسبی است.

آب بطری شده با درجه HPLC می تواند کار کند، اما باید به درستی ذخیره و نگهداری شود. گواهی تجزیه و تحلیل را بررسی کنید، شماره لات را ثبت کنید و هرگز تصور نکنید که یک ظرف قدیمی عاری از رشد بیولوژیکی است.

شستشوی گرادیان ناخالصی های آب را قابل مشاهده می کند

ناخالصی های آب در روش های گرادیان بیشتر قابل مشاهده است. در یک اجرای ایزوکراتیک، یک آلاینده جذب کننده اشعه ماوراء بنفش ممکن است به سادگی سطح پایه را کمی افزایش دهد. در یک گرادیان، کسر آب بالا شروع می شود و کسر حلال آلی در طول زمان افزایش می یابد. آلاینده ها را می توان در سر ستون نگه داشت و سپس با افزایش محتوای آلی شستشو داد. این باعث ایجاد قله‌های ارواح و یک خط پایه در حال حرکت می‌شود که می‌تواند در یکپارچگی و کمیت اختلال ایجاد کند.

به همین دلیل است که گرادیان خالی یکی از ساده ترین بررسی ها برای کیفیت آب است. گرادیان دقیق خود را بدون تزریق نمونه اجرا کنید. اگر پیک ها در جای خالی ظاهر شوند، فاز متحرک مشکوک است.

عادات روزانه که از خلوص آب محافظت می کنند

آب خالص تصادفی خالص نمی ماند. عادات زیر از شایع ترین مشکلات در عمل HPLC جلوگیری می کند.

• از آب یک سیستم تصفیه با کارتریج های تازه، یک لامپ UV فعال و ضدعفونی منظم استفاده کنید.
• آب را در یک ظرف تمیز و درپوش جمع کنید. تا زمانی که سیستم کار می کند، ظرف را باز نگذارید.
• آب را برای روزها ذخیره نکنید. تا حد امکان فاز متحرک را با آب شیرین در همان روز آماده کنید.
• از افزودن آب شیرین به مخزن نیمه پر خودداری کنید. به جای پر کردن محتویات مخزن، آنها را جایگزین کنید.
• یک گرادیان خالی در طول موج مورد استفاده برای تجزیه و تحلیل اجرا کنید و نتیجه را ثبت کنید.
• مقاومت، TOC و تاریخ جمع آوری آب را در سوابق تحلیلی خود ثبت کنید.

برای آزمایشگاه هایی که از آب بطری استفاده می کنند، قوانین مشابهی اعمال می شود. تاریخ انقضا را بررسی کنید، بلافاصله پس از استفاده در ظرف را ببندید و آب مصرف نشده را از لیوان به بطری برگردانید.

افزودنی ها مشکل آب را به مشکل روش تبدیل می کنند

فازهای متحرک به ندرت حاوی آب به تنهایی هستند. نمک‌های بافر، اسیدها، معرف‌های جفت یونی و برخی اصلاح‌کننده‌های تخصصی در غلظت‌های نسبتاً کم اضافه می‌شوند. اگر آب حاوی ناخالصی های جذب کننده اشعه ماوراء بنفش باشد، این ناخالصی ها ممکن است ظرفیت بافر را تغییر ندهند، اما همچنان می توانند در سیگنال آشکارساز ظاهر شوند.

مایعات یونی گاهی اوقات به عنوان اصلاح کننده فاز متحرک برای بهبود شکل پیک یا انتخاب پذیری استفاده می شود. وقتی یکی را انتخاب می کنید، همان استاندارد خلوص باید اعمال شود. به عنوان مثال، 1-اتیل-3-متیل ایمیدازولیوم تترا فلوئوروبورات یک مایع یونی رایج برای مطالعات کروماتوگرافی است. باید در آبی که قبلاً دارای مشخصات نوع 1 است حل شود. در غیر این صورت، افزودنی منبع دیگری از آلودگی می شود. اگر می خواهید خواص مربوط به جداسازی این ترکیبات را درک کنید، ما مروری بر نحوه عملکرد مایعات یونی در فرآیندهای جداسازی متغیرهای عملی را پوشش می دهد.

CAS:143314-16-3 -1 -Ethyl-3-methylimidazolium Tetrafluoroborate Liquids تامین کننده Ldet Technology سفارشی چین است CAS:143314-16-3 -1 -Ethyl-3-methylimidazolium Tetrafluoroborate Liquids و 1 -Ethyl-3-methylim... مشاهده محصول →

خلوص با تامین کننده شروع می شود

در Zhejiang Ldet، ما مایعات یونی و مواد شیمیایی ویژه تولید می کنیم. ما از تولید می دانیم که ناخالصی کمی در ماده اولیه می تواند عملکرد پایین دستی را تغییر دهد. به همین دلیل است که قبل از انتشار، محتوای آب، هالیدهای باقیمانده و رفتار UV را بررسی می کنیم. همان رشته در آزمایشگاه HPLC تعلق دارد: موادی را انتخاب کنید که دارای مشخصات مستند هستند. به عنوان مثال، 1-بوتیل-3-متیل ایمیدازولیوم تترا فلوئوروبورات با داده های خلوص موجود است که به شما امکان می دهد ارزیابی کنید که آیا با روش تشخیص شما سازگار است یا خیر.

CAS: 174501-65-6-1-Butyl-3-methylimidazolium tetrafluoroborate Liquids تامین کنندگان Ldet Technology CAS سفارشی چین است: 174501-65-6-1-Butyl-3-methylimidazolium tetrafluoroborate Liquids و 1-Butyl-3-methylimid... مشاهده محصول →

چه چیزی را در گواهی تجزیه و تحلیل بررسی کنیم

• محتوای هالید باقی مانده، زیرا هالیدها می توانند بر جداسازی تبادل یونی و خوردگی تأثیر بگذارند.
• محتوای آب، زیرا آب غلظت موثر ماده افزودنی را تغییر می دهد.
• یک طیف UV یا قطع UV، بنابراین می توانید جذب پس زمینه را پیش بینی کنید.
• سازگاری لات به لات، زیرا یک لات جدید نباید بی سر و صدا روش شما را تغییر دهد.

اگر برای تطبیق یک ماده با یک روش به کمک نیاز دارید، می توانید در مورد داده های خلوص و الزامات سفارشی با تیم فنی ما صحبت کنید .

آب را به عنوان بخشی از روش درمان کنید

خلوص آب در HPLC یک تنظیم یکباره نیست. این یک متغیر روزانه است که می تواند با فصل، بطری ذخیره سازی و وضعیت سیستم تصفیه تغییر کند. از آب نوع 1 استفاده کنید، TOC و مقاومت را تأیید کنید، آن را به درستی مدیریت کنید، و افزودنی هایی با قابلیت ردیابی انتخاب کنید. در روشی که بر اساس نانوگرم های آنالیت ساخته شده است، آب هرگز «فقط آب» نیست.